Како изводити серијска разблажења

Садржај

• фазе
• 1. метод Једноставно разблаживање
• Метода 2 Израчунајте коначни фактор разблажења и концентрацију

У хемији се разблаживање састоји од смањења концентрације датог раствора. Серијско разблаживање је једноставно поновљено разблаживање оригиналне растворе за брзо појачавање фактора разблажења. Ова врста разблаживања се често изводи током експеримената који захтевају високо разблажене растворе и високу тачност, попут оних који укључују кривуље концентрације на лог скали или оних које омогућавају израчунавање густине бактерија у одређеним подлогама. Врло често се изводе у биохемији, микробиологији, фармакологији или хемији.

фазе

1. метод Једноставно разблаживање

1. 
   

   
   Одредите праву течност за разблаживање (или разблаживач). Избор разрјеђивача је врло важан и овиси о отопини коју желите разриједити. Разблаживач је често дестилована вода, али није систематски. Дакле, са раствором који садржи бактерије или ћелије, уместо њега се користи медијум за културу. За серијско разређивање користи се исти разблаживач у свим епруветама.
   • Ако нисте сигурни који разблаживач користити, потражите помоћ од надлежне особе или потражите на Интернету шта људи морају да ураде за слично искуство.

2. 
   

   
   Припремите неколико епрувета које садрже 9 мл течности за разблаживање. Ове епрувете користиће се за прављење узастопних разблажења. Принцип је једноставан, узећете узорак почетног раствора и пренети га у следећу епрувету, а затим узети узорак ове епрувете да бисте је ставили у другу, итд.
   • Пре почетка разблаживања, препоручљиво је унапред идентификовати епрувете како бисте касније избегли нејасноће.
   • У свакој епрувети имаћете концентрацију за десет нижу него у претходној. Прва епрувета садржи разблажени раствор у десетој, другој, стоти, трећој, хиљаданој и тако даље. Унапријед одредите број разрјеђења како бисте избјегли стварање више епрувета него што је потребно и непотребног отапала.

3. 
   

   
   
   
   Припремите епрувету са мајчиним раствором. Ставите најмање 2 мл. Минимална количина основног раствора за серијско разређивање је један милилитар. Допустите 2 мл за могуће друго разређивање. Ову цев матичног решења можете да означите с „СМ“.
   • Пре него што започнете серијско разређивање, добро помешајте почетни раствор.

4. 
   

   
   Прво разблаживање. Пипетирајте 1 мл основног раствора у епрувету са ознаком "СМ" и пренесите ову количину у обележену епрувету. 1/10 која већ садржи 9 мл течности за разблаживање. Мешати да бисте добили хомогени раствор. У овој епрувети се сада налази 10 мл раствора: 1 мл основног раствора и 9 мл течности за разблаживање. Ово ново решење је десет пута мање концентрисано од претходног.

5. 
   

   
   Извршите друго разблажење. У другом серијском разблаживању, извући ћете 1 мл обележене растворе у епрувети 1/10 и сипаћеш га у цев 1/100 која већ садржи 9 мл течности за разблаживање. Цев 1/10 ће се добро измешати пре узорковања. Једном када је трансфер завршен, добро измијешајте епрувету 1/100. Раствор из обележене епрувете 1/10 је 10 пута концентрованија од оне на обележеној цеви 1/100.

6. 
   

   
   
   
   Поновите ову манипулацију ако је потребно. Овај поступак се може поновити онолико пута колико је потребно док се не постигне жељено разређивање. За експеримент који укључује кривуље концентрације, на тај начин можете добити низ раствора са разблажењима на јединицу, десетину (1/10), стоту (1/100) или хиљаду (1/1000).

Метода 2 Израчунајте коначни фактор разблажења и концентрацију

1. 
   

   
   Израчунајте однос коначно разблажење након серијског разблажења. Укупни омјер разблаживања постиже се множењем самог фактора разблаживања онолико пута колико има разрјеђења. Математички, формула је следећа: Год_t = Д₁ к Д₂ к Д₃ к ... к Д_nса Год_t представљајући укупни фактор разблаживања и Год_n, однос разблажења.
   • Дакле, претпоставимо да 4 пута заредом разређујете 1/10 течности. У формули замените фактор разблаживања његовом вредности: Д_t = 10 к 10 к 10 к 10 = 10 000
   • Коначни фактор разблажења четврте епрувете у вашем серијском разблаживању је 1/10 000. Концентрација раствора у последњој епрувети је сада 10 000 пута нижа од првобитне раствора.

2. 
   

   
   Одредити концентрацију раствора након разблаживања. Да бисте пронашли коначну концентрацију раствора након серијског разблаживања, морате знати почетну концентрацију. Формула је тада: , Ц_{коначна} = Ц_{почетни}/ Дса , Ц_{коначна} представља крајњу концентрацију разблаженог раствора, , Ц_{почетни}, концентрација основног раствора и Год, омјер разрјеђивања унапријед одређеног.
   • Дакле, ако разблажите ћелијски раствор са концентрацијом од 1.000.000 ћелија по мл, а однос разблажења постављен на 1.000, која ће бити коначна концентрација разблаженог узорка?
   • Користите формулу:
     • , Ц_{коначна} = Ц_{почетни}/ Д
     • , Ц_{коначна} = 1 000 000/1 000
     • , Ц_{коначна} = 1000 ћелија / мл

3. 
   

   
   Обратите пажњу на коришћене јединице. Када радите своје прорачуне, увек проверите да ли користите исте јединице. Дакле, ако кренете од концентрације ћелија по мл, ваш коначни резултат биће такође у ћелијама по мл. Ако је ваша почетна концентрација у деловима на милион (ппм), ваша коначна концентрација биће у деловима на милион.